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Waters液相色谱柱使用缓冲盐操作方法了解下
发布时间:2020-04-27   点击次数:39次
  Waters液相色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,主要的是与日常的维护密切相关。为延长色谱柱的使用寿命,维护您的利益,请仔细阅读此部分。
 
  色谱柱的使用寿命主要是分为柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。
 
  Waters液相色谱柱是一种用于液体色谱分析仪器。所以在选择色谱柱之前,多了解一下自己的样品和杂质,它们的类型结构、极性、酸碱性、分子量等。
 
  1、样品是极性和弱酸性的;C18可选择在100%酸性水溶液条件下进行检测,即选择一种能承载100%纯水并能很好保留极性化合物的色谱柱。
 
  2、如果样品的极性太强或酸度太强;可以选择CN、NH2或硅胶柱、HILIC(亲水色谱),也可以使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长,需要相对精确的流动相ph值,否则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗掉,基本上离子对色谱柱不能用于其他实验)
 
  正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出,因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话:使用前要过滤,使用后要冲洗。具体方法如下:
 
  1、等度条件:使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1。0ml/min流速冲洗60min;使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0。2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。
 
  2、梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1。0ml/min流速冲洗60min,再用该过渡流动相以1。0ml/min冲洗色谱柱120min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓,以避免梯度过程中缓冲盐析出。

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