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液相分析常见问题⑥ 峰面积变来变去无法定量
发布时间:2019-07-22   点击次数:360次


峰面积是定量分析的基础,峰面积的变化会导致精密度、标曲、定量分析等一系列问题

 

那么,如果遇到峰面积不稳定的情况,我们要怎么办?让我们分三种情况分别来看一看:

 

一、峰面积变小

 

1。 仪器漏液

仪器漏液会导致样品损失彩客网杀号,与正常测定结果相比,会出现色谱峰减小的情况。

→这种时候,需要检查系统压力,确保所有螺丝或连接处无漏液情况,排查仪器方面的原因。

 

2。 样品稳定性不好

有些样品自身稳定性不好,配置后,随着进样时间的推移会出现降解现象。

→如果连续进样过程中,主峰的峰面积减小,同时伴随杂质峰面积增加的情况,建议确认样品在溶剂或流动相中的稳定性情况

 

3。 进样瓶中样品量过少

当样品瓶中样品过少可能导致进样针未吸取到足够样品进样。

添加样品或使用内衬管即可解决。

 

4. 针峰面积减小

进样瓶的瓶盖拧紧后,瓶内会出现负压,可能导致进样器取样不准确。

→第二次进样时,由于瓶盖已经有孔,负压消除后进样峰面积会恢复正常;也可通过使用预开口进样小瓶来解决该类问题。

 

二、峰面积变大

 

可能是由于色谱柱或流动相条件导致样品吸附,特别是一些带电荷情况较为复杂的蛋白或多肽类样品。

彩客网杀号→大浓度进样、平衡可能的吸附位点

更换色谱柱优化方法

彩客网杀号(推荐更换MG、MGII、或Proteonavi进行尝试)

 

▲CAPCELL PAK 聚合物包被结构示意图

 

Proteonavi

 

Proteonavi是采用在多孔球形硅胶填料表面键合丁基(C4的高性能蛋白质•多肽分析专用色谱柱。该填料既具有硅胶类填料的高分离能力耐压性,又具有耐酸性抑制蛋白质吸附等特长。

 

★ 具备优越的耐酸性

★ 填料表面的蛋白吸附,即使样品量少也能被检出

★ 可对应从分析到制备的规模扩大化

 

三、峰面积忽大忽小,变化无规律

 

1. 自动进样器故障或混入气泡

→进样过程中,观察进样针中无气泡混入,如果自动进样器出现故障,需要咨询相应品牌仪器工程师。

 

2. 样品过于黏稠会导致进样不准确

稀释样品通常可以解决

 

3. 进样瓶中混入气泡

→部分样品容易混入气泡,比如一些表面活性剂类样品,观察进样瓶中是否有小气泡,或者对进样瓶进行超声脱气

 

PS: 以上对策主要针对液相分析检测中出现峰面积不稳的情况,如果在质谱分析中出现峰面积不稳,则可能会有离子化、基质效应等其他原因。

 

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